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2014-02-06T10:49:54Z

以“{{Hierarchy header}} 受体动力学一般用放射性同位素标记的配体（L）与受体（R）做结合试验研究。取一定量组织，磨成[...”为内容创建页面

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[[受体]]动力学一般用[[放射性同位素]]标记的[[配体]]（L）与受体（R）做结合试验研究。取一定量组织，磨成[[细胞]][[匀浆]]，分组加入不同浓度的放射性同位素标记的配体（药物），温孵待反应达平衡后，迅速过滤或离心分出细胞，用[[缓冲液]]洗去尚未结合的[[放射性]]配体，测定[[标本]]的放射强度，这是药物与细胞结合的总量，此后用过量冷配体（未用[[同位素标记]]的配体）洗脱特异性与受体结合的放射性配体再测放射强度，这是药物非特性结合量。将总结合量减去非特性结合量就可以获得L-R结合（B）曲线。如果L只与单一R可逆性结合，以B为纵座标，［L］为横座标，L-R结合曲线为直方双曲线（图2-5）。如将横座标改用log［L］（［］表示[[摩尔浓度]]）则呈典型的S形量效曲线。

按质量作用定律

<center>{{图片|gmpuxf8h.jpg|170px|00901.jpg (3355 字节)}}（E代表效应）</center>

反应达到平衡时

<center>{{图片|gmpuxknd.jpg|135px|00902.jpg (4301 字节)}}（KD是[[解离常数]]）</center>

因为［RT］=［R］+［LR］（RT为受体总量），代入上式并经推导得

<center>{{图片|gmpuxe9n.jpg|162px|00903.jpg (4781 字节)}}</center>

由于只有LR才发挥效应，故效应的相对强弱与LR相对结合量成比例，即

<center>{{图片|gmpuxijs.jpg|211px|00904.jpg (5607 字节)}}</center>

<center> 按此公式以E为纵座标，log［L］为横座标作图，结果与实验数据图形完全一致。{{图片|gmpux5il.jpg|400px|01001.jpg (36335 字节)}}</center>

当［L］=0时，效应为0，　

当［L］>>KD时，［LR］/［RT］=100%，达[[最大效能]]，即［LR］max=［RT］。

当［LR］/［RT］=50%时，即EC50时，KD=［L］。

KD表示L与R的亲和力（affinity），单位为摩尔。各药（L）与R亲和力不同，KD越大时亲和力越小，二者成反比。令pD2=-logKD则其值不必用摩尔单位、数值变小且与亲和力成正比，在半对数座标上也较易理解，故pD2较为常用。

药物与受体结合产生效应不仅要有亲和力，还要有[[内在活性]](intrinsic activity),后者用α表示，0≤α≤100%。故上述公式应加入这一参数：E/Emax= α［LR］/［RT］。两药亲和力相等时其效应强度取决于内在活性强弱，当内在活性相等时则取决于亲和力大小（图2-6）。

将上述受体动力学基本公式（［LR］/［RT］=［L］/KD+［L］）加以推导改变可将S形量效曲线改变为直线关系，使计算方便很多也准确很多：

1．双倒数图　将上述基本公式两侧取倒数后加以推导得1/［LR］=KD/［L］［RT］+1/［RT］。以1/［LR］为纵座标、1/［L］为横座标作图得直线（图2-7）,斜率为KD［RT］,即KD/Emax，与纵座标交点为1/［RT］，即1/Emax ，与横座标交点为-1/KD。

2．Scatchard图推导得公式［LR］/［L］=［RT］/KD-［LR］/KD以［LR］/［L］，为纵座标，［LR］为横座标作图也呈直线（图2-8），斜率为-1/［KD］，与纵座标交点为［RT］/KD，与横座标交点为［RT］。

这些直线关系图解在受体研究中有重要用途，也可加深对受体动力学的理解

<center>{{图片|gmpux8t8.jpg|423px|01101.jpg (36222 字节)}}</center>

''' 图2-6 药物与受体的亲和力及其内在活性对量效曲线的影响 A图 a,b,c三药与受体的亲和力（pD2）相等，但内在活性（Emax）不等 B图 a,b,c 三药与受体的亲和力（pD2）不等，但内在活性（Emax）相等'''

<center>{{图片|gmpux4g2.jpg|493px|01102.jpg (13230 字节)}}</center>

''' 图2-7 受体结合量效关系的双倒数作图'''

<center>{{图片|gmpux7rw.jpg|534px|01201.jpg (16900 字节)}}</center>

''' 图2-8 受体结合量效关系的Scatchard作图'''

一些活性高的药物与相应受体结合的量效曲线（B-log［L］曲线）并不一定与结合后产生效应的量效曲线（E-log［L］曲线）相重合。因为这类药物只需与一部分受体结合就能发挥最大效应（Emax），剩余下未结合的受体为储备受体(spare receptor)。这对理解[[拮抗药]]作用机制有重要意义，因为这类拮抗药必须在完全占领储备受体后才能发挥其[[拮抗]]效应。

受体激动药（L）对相应受体有较强的亲和力，也有较强的内在活性，α达100%。受体拮抗药（I）虽然也有较强的亲和力，但缺乏内在活性，α=0，本身不能引起效应，却占据一定量受体，拮抗[[激动药]]的作用。[[竞争性拮抗药]](competitive antagonist)能与激动药互相竞争与受体结合，这种结合是可逆性的。在实验中如果L与I同时存在则［RT］=［R］+［LR］+［IR］，代入上述基本公式并加推导得

<center>{{图片|gmpuxa1a.jpg|242px|01202.jpg (5956 字节)}}</center>

可见L和I同时存在时，如L这一因素固定不变，[[药理效应]]大小取决于［I］/K1（K1是I的解离常数）。［I］越高及（或）K1越小时效应越弱，即拮抗效果越强。当［L］>>［I］时，［LR］/［RT］→100%，这就是竞争性拮抗药使量效曲线平行右移（Emax不变）的理论解释（图2-9）。

在有一定量的竞争性拮抗药［I］存在时，增加［L］至［L’］仍可使药理效应维持在原来单用［L］时的水平。据此，

<center>{{图片|gmpuxb0y.jpg|330px|01203.jpg (6932 字节)}}</center>

将之推导得

<center>{{图片|gmpuxd47.jpg|152px|01204.jpg (4332 字节)}}</center>

［L’］/［L］是剂量比 (dose ratio)，即将［L］增加［L’］/［L］倍就能克服［I］的[[拮抗作用]]。该比值也取决于［I］/K1而与［L］绝对值或KD无关。将此公式两侧取log，并以log（［L’］/［L］-1）为纵座标、以-log［I］为横座标作图，呈直线，斜率为1，与横座标交点为-logK1，即pA2此即Schild 图（图2-10）。按Schild定义，拮抗参数pAx是指剂量比为X时竞争性拮抗药浓度的负对数值。常用pA2，即［L’］/［L］=2时的数值，则pA2=-log［I］=-logK1，些参数反映拮抗药的拮抗强度，其值越大表示拮抗作用越强。

<center>{{图片|gmpuxhgx.jpg|374px|01301.jpg (29573 字节)}}</center>

''' 图2-9 竞争性拮抗药（A图）、[[非竞争性拮抗药]]（B图）及部分 激动药（D图）对激动药（虚线）量效的影响及激动药（C图） 对[[部分激动药]]（虚线）量效曲线的影响'''

<center>{{图片|gmpuxc0u.jpg|494px|01302.jpg (15156 字节)}}</center>

''' 图2-10 竞争性拮抗作用的Schild作图'''

非竞争性拮抗药(noncompetitive antagonist)与R结合非常牢固，分解很慢或是不可逆转，使能与L结合的R数量减少。另一类非竞争性拮抗药可阻断受体后某一中介反应环节而使受体-效应功能容量减少。二者共同特点是使量效曲线高度（Emax）下降。但L与剩余的R结合动力学不变，即KD不变。在双倒数图中更易看出这一关系（图2-11）。

<center>{{图片|gmpuxg9b.jpg|391px|01401.jpg (18553 字节)}}</center>

''' 图2-11 竞争性拮抗作用与非竞争性拮抗作用比较 A图量效曲线 B图双倒数曲线 X 单用激动药 Y 竞争性拮抗药对激动药的拮抗作用 Z 非竞争性拮抗药对激动药的拮抗作用'''

还有一类药物称为部分激动药(partial agonist)和R结合的亲和力不小，但内在活性有限，α<100%，量效曲线高度（Emax）较低。与激动药同时存在时，当其浓度尚未达到Emax时，其效应与激动药协同，超过此限时则因与激动药竞争R而呈拮抗关系，此时激动药必需增大浓度方可达到其最大效能。可见部分激动药具有激动药与拮抗药两重特性。（图2-9C、D）

目前放射性配体-受体结合技术已普遍用于受体研究，但必需和药理效应实验结合进行才有意义。

为什么[[化学]]结构类似的[[药物作用]]于同一受体有的是激动药，有的是拮抗药，还有的是部分拮抗药？还可用二态模型(two-state model) 学说解释。按此学说，[[受体蛋白]]有两种可以互变的[[构型]]状态：静息状态（R）与活动状态（R*）（图2-12）。静息时平衡趋向R。活动药只与R*有较大亲和力，L-R*结合后充分发挥药理效应。部分激动药（P）与R及R*都能结合但对R*的亲和力大于对R的亲和力，故只有部分受体被激活而发挥较小的药理效应。拮抗药对R及R*亲和力相等，且能牢固结合，但保持静息状态时两种受体状态平衡，拮抗药不能激活受体但能阻断激动药作用。个别药物（如苯二氮卓类）对R亲和力大于R*，结合后引起与激动药相反的效应，称为超拮抗药(superantagonist)。这一学说容易理解，但有待进一步实验证实。
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药理学/受体动力学 - 版本历史

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