112.247.109.102：以“对心肌酶检查，检查心肌酶主要是确定心肌缺血坏死或细胞膜通透性。 1.血清酶总论：P232 LDH、AST、CK及其同I...”为内容创建页面

2014-01-25T22:32:10Z

以“对心肌酶检查，检查心肌酶主要是确定心肌缺血坏死或细胞膜通透性。 1.血清酶总论：P232 LDH、AST、CK及其同I...”为内容创建页面

新页面

对[[心肌]]酶检查，检查心肌酶主要是确定[[心肌缺血]][[坏死]]或[[细胞膜]]通透性。

1.[[血清酶]]总论：P232

LDH、AST、CK及其同I酶，α-HBD　　
==一、血清酶的来源和分类：==
（一）根据来源及[[血浆]]中发挥作用：

1.血浆持异酶：主要在血浆中发挥催化作用的酶类

eg：[[凝血酶原]]，[[凝血因子]]（X、ⅫI、Ⅶ）[[纤溶酶]]原，[[前激肽释放酶]]

假性[[胆碱]]脂酶：铜蓝[[蛋白]]，[[脂蛋白脂肪酶]]，[[肾素]]

假性胆碱脂酶：水解可能干扰[[乙酰胆碱]]脂[[酶活性]]的一些[[化合物]]

铜蓝蛋白：是一种[[氧化酶]]，与Fe蛋白，动员有关

脂蛋白脂肪酶：参与[[脂蛋白]]中脂肪的水解和储存

2.[[外分泌]]酶

eg：[[唾液]]和[[胰淀粉酶]]，[[胰脂肪酶]]，[[胃蛋白酶]]，[[胰蛋白酶]]和[[前列腺酸性磷酸酶]]等。

在血浆中很少发挥催化作用

其浓度与其分泌腺体的功能有关

3.[[细胞]]酶：存在于各细胞和组织中进行物质[[代谢]]的酶类

在[[血液]]中无重要的催化作用

（1）一般[[代谢酶]]：无器官特异性

（2）[[组织专一性酶]]：OCT、SDH、ADH主要存在于肝。其活性能较特异地反映肝cell的病变。

（二）根据[[酶促反应]]性质可将酶分为六类：

1.[[氧化还原酶]]类：[[催化]][[底物]]进行[[氧化还原]]反应。eg:LDH

CHO CHO

C=0＋NADH＋H+ LDH CH－OH＋NAD+

COOH COOH

[[丙酮]]酸 [[乳酸]]

eg：LDH[[琥珀酸脱氢酶]]，[[细胞色素氧化酶]]，[[过氧化物酶]]

2.[[转移酶]]类：催化底物之间进行某些基团的转移或交换的酶类

COOH CH3 COOH CH3

（CH2）2 ＋HC－NH2 ALT （CH2）2 ＋ C＝0

C＝0 COOH HC－NH2 COOH

COOH　COOH

α-[[酮戊二酸]] [[丙氨酸]] [[谷氨酸]] 丙酮酸

eg：[[转氨酶]]、[[已糖]][[激酶]]、[[磷酸化酶]]

3.[[水解酶]]：催化底物之间发生水解反应的酶类

eg：[[淀粉酶]]、[[蛋白酶]]、[[脂肪酶]]、[[磷酸酶]]

ALP

对－[[硝基苯]]酚[[磷酸盐]]对－硝基苯酚＋磷酸盐

水解

4.[[裂解酶]]类：催化底物移去一个[[基因]]而留下双键的反应或逆反应的酶类。

eg：[[碳酸酐酶]]，[[醛缩酶]]

5.[[异构酶]]类：催化各种同分[[异构体]]之间互相转化的酶类

eg：[[磷酸已糖激酶]]，[[消旋酶]]

磷酸已糖激酶

6-[[磷酸葡萄糖]]6-[[磷酸果糖]]

6.[[合成酶]]类（[[连接酶类]]）：催化两分子底物合成－[[分子]]的化合物，同时必须[[偶联]]有ATP[[磷酸]]键断裂。　　
==二、血清酶的命名：==
1.习惯命名法：根据酶来源，催化反应性质及底物来命名。

底物：淀粉酶，蛋白酶

性质：[[脱氢酶]]、转移酶

来源：胰淀粉酶、胃蛋白酶

底物＋性质：[[谷草转氨酶]]

2.系统命名法：[[酶反应]]底物、性质均要列出，各底物间以“：”隔开

编号：（1）1为氧化还原酶类

2为转移酶类

3为水解酶类

4为裂解酶

（2）反应作用的位置，即可用于哪个基因

1.1 －CH－OH

1.2 －C＝0

1.3 －C＝CH

1.4 －C＝NH

1.5 －CH－NH2

1.6 NADH、NADPH

（3）

1.1.1 氯化[[还原酶]] CH－OH [[受体]]：NAD+ NADP-

1.1.2 氯化还原酶 CH－OH 受体：[[细胞色素]]

1.1.3 氯化还原酶 CH－OH 受体：分子氧　　
==三、血清酶的去路：==
（一）血清酶的[[排泄]]：P234

1.尿路：是[[血清]]中[[低分子量]]酶类主要去路

2.[[胆汁]]不是血清酶排泄途径

（二）肝或[[网状内皮系统]]对血清酶的清除：

[[肝脏]]对以[[酶原]]形式存在的酶类有消除作用

（三）[[酶蛋白]]在[[血管]]内的[[失活]]和分解：

（四）转入其它体液　　
==四、酶的活性单位及[[生理]]差异：==
（一）酶的活性单位：在规定条件，每分钟催化1umol的[[基质]]发生转化所需要的酶量。

规定条件包括：温度、PH、缓冲系统、基质浓度及辅助因素

（二）酶的单位计算

1.根据标准计算：

（U/L）酶活力单位＝A样品/A标准×C标准×Vt/Vs×1/t×1000

总体积-样品+基质

2.根据反应底物的消光系数：

酶活力＝A样品/ξd×Vt/Vs×1/t×1000

消光系数比色杯厚度

（三）血清酶的生理差异：

1.性别：男＞女

2.年龄：儿童磷酸酶＞成人 [[婴儿]] LDH 2倍成人

3.进食：对酶活力本身无影响，但可影响比色时的[[浊度]]

4.活动：

5.[[妊娠]]：ALT、LDH、ALP↑　　
==五、[[疾病]]时血清酶改变的机制：==
（一）合成异常：P238

1.合成减少

2.合成增加

（二）酶从损伤细胞中释放增加：

是疾病时大多数血清酶↑的主要机制

（三）其它机制：

[[肾衰]]→[[尿少]]→ 血淀粉酶↑

药物，毒物可作为酶的[[抑制剂]]

2.AST的测定：

AST 谷草转氨酶（GOT）

[[天门冬氨酸]]氨基移换酶

一、AST分布：

广泛分布于人体各组织、器官中，主要在心、肝、[[骨骼肌]]、肾、胰、脾、肺、RBC中。其中以心肌cell含量最丰富。

主要存在[[线粒体]]中（M－AST）。胞浆中（C－AST）仅占12%，是可溶性的正常血清中AST很少，只有上述组织发生病变

时，才释放入血。　　
==方法学介绍==
（一）赖氏比色法：＜实验＞P115

1.原理：

COOH COOH COOH COOH

（CH2）2 ＋ CH2 AST （CH2）2 ＋ CH2

C＝O HC-NH2 37℃ HC－NH2 C＝0

COOH COOH COOH COOH

酮戊二酸天门冬氨酸谷氨酸 [[草酰乙酸]]

COOH CH3

CH2 [[柠檬酸]][[苯胺]] C＝0＋CO2

C＝0 脱羧 COOH

COOH

丙酮酸

CH3

C＝0 ＋ →丙酮酸－2.4－＝＋H2O

COOH 硝基苯腙

2.4－[[二硝基苯肼]] 酸性，草黄色，加碱，棕红色

与标准浓度丙酮酸生成的[[苯腙]]比色（505nm）

2.正常参考值：8-28u

3.注意事项

（1）[[溶血]][[标本]]不能用于AST测定，因为RBC中AST是血清10倍。

（2）M－AST、C－AST理化性质，Ag性均不同，由不同基因控制，但催化相同反应，是同I酶

（3）赖氏比色法简易性，相对准确性，所以是普及的原因

（4）难以确定在酶反应期内，产物的生成与时间成正比。

草酰乙酸是AST竞争抑制剂，随反应进程，产物，酶反应不断。

（5）显色反应及底物浓度问题。

酮戊二酸也可与2.4－二硝基苯肼反应，产生另一棕色苯腙，使AST测定[[假阳性]]增高。

为了减少其干扰，波长选在490-530nm，此时丙酮酸为－酮戊二酸2倍

2.4－二硝基苯肼在碱性溶液中也可呈色，使吸光度伪性增高。

（6）A、偶联转氨作用：

ALT

丙酮酸＋谷氨酸丙氨酸

所以肝疾病AST、ALT同时，使丙酮酸消耗，AST测定结果减低。

B、产物旁路

乳酸

LDH ↑NADH＋H+

丙酮酸

↑

α-酮戊二酸＋[[天门冬]]aa AST 草酰乙酸＋谷aa.

↓MDH＋NADH＋H+

[[苹果]]酸

所以受LDH、MDH干扰，使AST测定结果减低

（二）酶偶联一些外连续监测法：

1.原理：L-天门冬aa.＋α-酮戊二酸 AST 草酰乙酸＋谷aa.

草酰乙酸＋NADH＋H+ MDH L-苹果酸＋NAD+

340nm

吸光度下降值，计算AST活力

2.参考值：男＜40u/L 37℃

女＜35u/L 37℃

3.注意事项：

（1）采血后立即分离血清，避血溶血

血清与[[血块]]不可长时间设置在一起

（2）血清，室温4-8h，2-6℃ 7d -20℃ 8月活力不变

（3）抗凝剂血浆：

EDTA、2Na，[[肝素]]对AST无抑制作用

不能用草酸盐抗凝剂，因为可抑制AST活性

（4）AST浓度过高，稀释重做。

（5）不存在偶联转氨作用和产物旁路问题

（6）不存在酮戊二酸干扰，可适当提高底物浓度使反应完全

（7）底物中存在[[谷氨酸脱氢酶]]（GLDH）

α-酮戊二酸＋NADH＋H+＋NH3 GLDH 谷aa.＋NAD+＋H2O

消耗NADH＋H+，使结果伪性增高。

（8）轿清中丙酮酸LDH

丙酮酸＋NADH＋H+ LDH 乳酸＋HAD+

消耗NDAH＋H+，使结果偏高

（9）在指示酶作用有，草酰乙酸可自动脱羧生成丙酮酸，使结果偏低。应加LDH，使之成为乳酸，从而更加准

确反映AST活力。

所以MDH、LDH共同作为指示酶

三、临床意义：

1.AST在心肌中含量最多，所以在[[急性心梗]]时6-12h↑，48h达高峰，3-5d恢复正常

2.[[急性肝炎]]，手术后，[[药物中毒]]，AST明显↑

肝Ca、[[慢性肝病]]，[[心肌炎]]，AST中度

[[肌炎]]，[[胸膜炎]]，[[肾炎]]，AST轻度

3.急性肝炎，AST，ALT同时↑，可达正常值10-30倍，[[黄疸]]前期就已↑，有助于临床早期诊断。

3.AST同I 酶：

<黄>血清酶测定时诊断心梗的意义：

心肌C、肝C出现实质性损害　M－AST　C－AST↑

M－AST↑对[[肝病]]预后有一定诊断意义

心梗M－AST↑　所以M－AST越↑，心梗并发[[心衰]]的[[发病率]]、[[死亡率]]越↑，尤其推测死亡率方面意义更大。

4.血清[[乳酸脱氢酶]]的测定：　原理　PH对其影响　

LDH　[[糖酵解酶]]，氧化还原反应

有五种同I酶LDH1－LDH5

一、LDH分布和特点：

广泛分布，主要在肾，其次心，骨骼肌，其它肝、脾、胰、肺，上述组织病变，血清中LDH。主要催化以下反应：

L-乳酸＋NAD＋　丙酮酸＋NADH＋H+

PH碱　正反应（L-P）

PH中性　逆反应（P-L）

二、方法学

（一）比色法：＜实验＞P122

1.原理：L-乳酸＋NAD＋　LDH　丙酮酸＋NADH＋H+

PH8.8

丙酮酸＋2.4－二硝基苯肼　→　丙酮酸－2.4－[[二硝基苯]]腙

酸草黄色

加NaOH　棕红色

颜色越深，酶活力越大

2.参考值：225-540u/dL

3.注意事项：产物生成量与[[反应时]]间不成比例

（1）标本严禁溶血　因为RBC内LDH活力是血清内的100倍。

（2）LDH受重金属盐、EDTA、草酸盐的抑制。最好用[[血清标本]]

（3）血清标本2-6　数天，室温48h

（4）准确性和重复性在酶学检验中最差，因为五种同I酶与底物结合能力不同，最适反应条件不同，在[[病理]]

LDH组成差异大，所以很难找出LDH最适反应条件。eg：心梗LDH1↑，肝病LDH5↑

（5）结果＞2500u/dL，将标本稀释重做。

（二）连续监测法（酶法）：＜实验＞P120

1.原理：L-乳酸＋NAD＋　PH8.8-9.8　丙酮酸＋NADH＋H+

逆反应比正反应速度快2-3倍　所以[[反应偏向]]左侧，多用P-L

LDH

[[丙酸]]酸＋NADH＋H+乳酸＋NAD+

PH7.4

340nm处监测，吸光度下降幅度与LDH成正比。

2.参考值：240-460u/L 37℃

3.注意事项：

（1）逆反应优点：

a.[[试剂]]用量少，所需NAD+，只是L-P所用NADH＋H+的3％，样品少

b.单位时间内吸光度变化大，逆反应线性范围较大，酶促反应速率比正反应快3倍，利于测定。　时间短

c.酶活力随时间的[[线性关系]]较长

（2）正反应优点：

a.NADH＋H+比NAD+稳定，价格低，易得到纯品。

底物L-乳酸与逆反应底物丙酮酸稳定

b.L-乳酸对LDH的抑制低于丙酮酸对LDH的抑制

（3）连续监测法可利用正、逆反应，优于比色法。

（4）[[金属离子]]的存在可以降低NAD+稳定性

试剂中可加入EDTA，使EDTA络合金属离子，增加NAD+稳定。

（5）NAD+不稳定，产生对LDH有抑制作用的物质。在碱性液中比在酸性液中稳定，在Tris[[缓冲液]]中比在磷酸

盐缓冲液中稳定。

（6）某些批号的NADH＋H+还有LDH的物质，使用前检查NADH＋H+质量，NADH＋H+溶于Tris缓冲液，分别在

260nm和340nm测吸光度，应＜2.3，若＞2.3，说明含有在260nm处有吸收峰的杂质，如NAD+、[[腺苷]]。

（7）α-酮[[丁酸]]，[[羟基]]丙酮酸、[[乙醛酸]]可代替丙酮酸作底物。

（8）标本不能溶血

三、临床意义：

1.LDH↑：急性心梗、骨骼肌损伤、某些[[肝炎]]、[[白血病]]、[[肝硬化]]、[[阻塞性黄疸]]及[[恶性肿瘤]]。

2.心梗：12-24h，LDH↑，48-72h达高峰，1-2W后恢复正常

3.恶性肿瘤[[晚期]]LDH，恶性肿瘤引起的胸腹水中LDH↑

4.[[慢性肾小球肾炎]]、SLE、[[糖尿病肾病]]等病人中，尿LDH可达正常人3-6倍，尿中含多种抑制LDH活性物质，如[[尿素]]，

小分子[[肽]]类。

低PH值也可抑制LDH活性。

5.[[尿毒症]]患者LDH正常，[[透析]]后LDH↑，因为体内尿素较高

[[分类:心脏]]

心肌酶谱 - 版本历史

112.247.109.102：以“对心肌酶检查，检查心肌酶主要是确定心肌缺血坏死或细胞膜通透性。 1.血清酶总论：P232 LDH、AST、CK及其同I...”为内容创建页面