112.247.109.102：以“弗氏佐剂（Freundadjuvant）,这是目前最常用于动物实验的佐剂，它是将抗原水溶液与油剂（石蜡油或植物油）...”为内容创建页面

2014-01-27T08:00:49Z

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[[弗氏佐剂]]（Freundadjuvant）,这是目前最常用于动物实验的[[佐剂]]，它是将[[抗原]]水溶液与[[油剂]]（[[石蜡油]]或[[植物油]]）等量混合，再加[[乳化剂]]（[[羊毛脂]]或叶[[吐温]]80）制成油包水抗原[[乳剂]]，称之为不完全弗氏佐剂。如在不完全佐剂中加入[[分枝杆菌]]（如死卡苗）则称为完全弗氏佐剂。

弗氏佐剂是现在动物实验中最常用的佐剂，分为不完全弗氏佐剂和完全弗氏佐剂。不完全弗氏佐剂是[[液体石蜡]]与羊毛脂混合而成，组分比为1～5：1，可根据需要而定，通常为2：1。不完全佐剂中加[[卡介苗]](最终浓度为2～20mg/ml)或死的[[结核分枝杆菌]]，即为完全弗氏佐剂（FCA）。一般首次注射时用1／2体积FCA加上1／2体积的抗原进行[[乳化]]，第二次或第三次注射时用不完全佐剂或不用佐剂。如不加佐剂，则抗原量增大10-20倍。

配制方法：按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内，用[[超声波]]使之混匀，[[高压灭菌]]，置4℃下保存备用。

在[[免疫]]动物前，先将弗氏佐剂与抗原按一定比例混合，佐剂和抗原体积比一般为1：1，制备成 "油包水"乳状液。因为含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化[[复合物]]，注射入动物体内时一定要保持乳化状态。抗原用量视抗原分子量不同及[[免疫原性]]及免疫动物不同而有一定差异，无统一标准和固定模式。一般是每兔（约2kg重）或每羊（约20kg重）第1次注射抗原1mg，以后逐次增加抗原量，最多每次不超过3mg。佐剂与抗原乳化可按如下方法进行：

（1） [[研磨法]]：先将佐剂加热并取适量放入[[无菌]]的玻璃[[研钵]]内，待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液，边滴边按同一方向研磨，滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后，继续研磨一段时间，使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。本法适于制备大量的佐剂抗原，缺点是研钵壁上[[粘附]]大量乳剂，抗原损失较大。

（2） [[注射器]]混合法：将等量的弗氏佐剂和抗原溶液分别吸入两个注射器内，两注射器之间以一细胶管相连，注意排净空气，然后交替推动针管，直至形成粘稠的乳剂为止。本法优点是容易做到[[无菌操作]]，抗原损失少，适用于制备少量的抗原乳剂。但同时难以乳化完全，个别抗原，用塑料注射器根本推不动，而用玻璃注射器又有渗漏。制备好的乳化剂经鉴定才能适用。鉴定方法是将乳化剂滴入冷水中，若保持完整不分散，成滴状浮于水面，即乳化完全，为合格的油包[[水剂]]。

（3） [[超声]]：实验室条件好点的，比如说有[[超声破碎]]仪的，一定要控制超声频率和时间，超声容易激发一些[[自由基]]，对抗原有未知损害。乳化方法要根据抗原和需要而定。　　
==其他[[免疫佐剂]]的物质==
弗氏佐剂也属于免疫佐剂。其他免疫佐剂的物质有：①微生物及其产物，常用的微生物有分枝[[杆菌]]、[[短小棒状杆菌]]、[[百日咳杆菌]]以及处左兰氏阴性杆菌的提取物[[脂多糖]]，自分枝杆菌的提取物质[[胞壁酰二肽]]等。②多聚[[核苷酸]]，如多聚[[肌苷酸]]：[[胞苷酸]]（poly1:C）,[[多聚腺苷酸]]（poly1:A：μ）等;。③无机物，如[[明矾]]及氢化铝等。

佐剂的作用机制尚不完全清楚：①它可能增加抗原的表面面积，易为[[巨噬细胞]]所吞噬；②延长抗原在体内的存留期，增加与[[免疫细胞]]接触的机遇；③诱发抗原注射部位及其[[局部淋巴结]]的[[炎症反应]]，有利于刺激免疫细胞的[[增殖]]作用。

[[分类:生物化学]][[分类:免疫医学]]

弗氏佐剂 - 版本历史

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